Der als Holiday bekannte Killer verfolgt weiterhin die Falcone-Verbrecherfamilie, während in Gotham City eine neue Klasse von kostümierten Kriminellen auftaucht. Bruce Wayne (Stimme im Original: Jensen Ackles) steht unter dem Bann der giftigen Poison Ivy (Katee Sackhoff), während Batman nirgendwo in der Stadt zu finden ist. Befreit durch einen unwahrscheinlichen Verbündeten, deckt Bruce schnell den wahren Schuldigen auf: Poison Ivy's Arbeitgeber Carmine Falcone (Titus Welliver). Der Römer, dessen Reihen durch Holiday dezimiert wurden und dessen Geschäfte außer Kontrolle geraten sind, ist gezwungen, sich weniger wünschenswerte Partner zu suchen - die Schurkengalerie von Gotham City. In der Zwischenzeit kämpft Harvey Dent (Josh Duhamel) an zwei Fronten: Er versucht, den Mafia-Krieg zu beenden, während er gleichzeitig mit einer angespannten Ehe zu kämpfen hat. Und nach einem Angriff, der Harvey schrecklich entstellt, entfesselt der Staatsanwalt die Dualität seiner Psyche, die er sein ganzes Leben lang zu unterdrücken versucht hat. Jetzt, als Two-Face, beschließt Dent, das Gesetz in seine eigenen Hände zu nehmen und diejenigen zu bestrafen, die ihm, seiner Familie und ganz Gotham Unrecht getan haben. Letztendlich muss der Dunkle Ritter die tragischen Teile zusammenfügen, die Two-Face, den Holiday Killer, Batman und Gotham City selbst hervorgebracht haben.